Estabelecendo um modelo tridimensional de co-cultura de gânglios da raiz dorsal murina e células cancerígenas: um modelo in vitro para estudar a invasão de células cancerígenas perineurais

A invasão perineural ou PNI refere-se à migração de células cancerígenas ao longo dos nervos e sua subsequente invasão no perineuro - um microambiente adequado para o crescimento e metástase do câncer.

Para imitar o PNI in vitro, comece adicionando uma gota de matriz extracelular ou suspensão de ECM em uma placa de cultura de modo que ela assuma a forma de um hemisfério. Agora, incube a placa de cultura para reforçar as características estruturais e funcionais do andaime 3D.

Em seguida, coloque cuidadosamente um gânglio da raiz dorsal pré-colhido ou DRG, um aglomerado de neurônios sensoriais, no centro da gotícula semissólida da MEC. Incube para incorporar o DRG na gota do ECM.

Depois disso, adicione um meio de crescimento adequado e incube. A ECM suplementada com nutrientes favorece o surgimento de DRG em pequenas projeções nervosas chamadas neuritos que crescem radialmente em direção à circunferência da gota.

Remova o meio gasto para preparar a gota ECM para o ensaio subsequente. Semeie células cancerígenas aderentes coradas com fluorescência sobre a gotícula. Devido à forma hemisférica, as células cancerígenas rolam e se instalam ao longo da periferia da gota.

Incube a placa de