Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Pesquisa sobre o Câncer
0 visualizações • 3:08 min. • April 30th, 2023
Para extração da medula espinhal, comece com um camundongo sacrificado em decúbito ventral. Pulverize etanol para evitar qualquer contaminação potencial da pele.
Corte a linha média da cabeça à cauda e abra a pele para revelar o tecido subjacente. Examine o crânio do camundongo para localizar a junção craniocervical que conecta o crânio à coluna cervical.
Em seguida, faça uma incisão perpendicular na junção craniocervical para cortar a conexão entre a cabeça e o pescoço. Disseque a coluna até a quinta vértebra lombar. Posteriormente, corte a coluna na quinta vértebra lombar para cortar a conexão dos níveis vertebrais inferiores.
Agora, gire o mouse para a posição supina. Corte o peritônio e a parede torácica para expor a cavidade abdominal e torácica. Remova os órgãos peritoneais e retroperitoneais para acessar a coluna vertebral.
Corte as costelas para separar a coluna vertebral do resto do corpo. Por último, enxágue a medula espinhal isolada com uma solução salina fria para remover quaisquer contaminantes do sangue.
Depois de sacrificar o animal em uma câmara de CO2, molhe o pelo com etanol 70% e deixe secar. Prenda o mouse em decúbito ventral e, em seguida, faça uma incisão na linha média estendendo-se craniocaudalmente da parte posterior do pescoço até a coluna lombar.
Em seguida, use uma pinça para elevar os retalhos dérmicos bilateralmente e expor o tecido subcutâneo. Palpe o crânio do camundongo até que a junção craniocervical seja identificada. Use uma tesoura inclinada perpendicularmente ao animal para cortar os músculos cervicais e a coluna na junção craniocervical. Em seguida, disseque a coluna caudalmente e use uma tesoura para realizar uma transecção caudal completa na quinta vértebra lombar.
Em seguida, posicione o mouse em decúbito dorsal e, depois de fazer uma incisão ao longo da linha média do pescoço ao abdômen, retraia a pele lateralmente e abra o peritônio.
Cranialmente, abra a parede torácica com uma tesoura. Após a remoção dos órgãos peritoneais e retroperitoneais, use uma pinça e uma lâmina cirúrgica para cortar as costelas, deixando aproximadamente 5 milímetros de costelas salientes da coluna vertebral. Remova a coluna vertebral do resto do corpo e lave duas vezes com PBS frio.