Ensaio de metil tiazolil tetrazólio ou MTT: um ensaio colorimétrico para medir a resistência a medicamentos por meio da determinação da atividade metabólica em células cancerígenas

O ensaio de metil tiazol tetrazólio ou MTT permite a avaliação da viabilidade celular com base na medição da atividade metabólica celular.

Para iniciar o ensaio, prepare uma faixa de concentrações crescentes do medicamento de interesse. Adicione volumes iguais das diferentes concentrações de drogas nos poços de uma placa de vários poços.

Em seguida, pipete uma suspensão de células cancerígenas parentais sensíveis a medicamentos desejadas e suas variantes resistentes a medicamentos em um meio adequado, cada uma em um conjunto de poços contendo diferentes concentrações de drogas. Incube a placa.

Em cultura, as células cancerígenas sensíveis a medicamentos são sensíveis às moléculas do medicamento, levando à morte celular mesmo em baixas concentrações. Pelo contrário, as células cancerígenas resistentes a medicamentos são insensíveis às moléculas do medicamento, facilitando sua sobrevivência e proliferação mesmo em concentrações mais altas do medicamento.

Trate as células com solução de MTT e incube. O MTT, um sal de tetrazólio carregado positivamente, penetra prontamente nas células metabolicamente ativas. Dentro dessas células, as enzimas oxidorredutases dependentes de NAD (P) H red