Extração de exossomos baseada em esferas magnéticas: uma técnica para isolar exossomos específicos de biofluidos

Os exossomos são estruturas vesiculares extracelulares secretadas pelas células em biofluidos. Para capturar exossomos específicos de biofluidos, comece tomando esferas magnéticas revestidas de estreptavidina em um tubo.

A este tubo, adicione anticorpos anti-humanos biotinilados. A biotina presente nos anticorpos tem uma alta afinidade pela estreptavidina presente nas esferas magnéticas. Isso resulta na conjugação dos anticorpos com as esferas magnéticas.

Em seguida, adicione uma solução de bloqueio rica em proteínas ao tubo que contém as esferas magnéticas marcadas com anticorpos. As proteínas na solução de bloqueio se ligam aos locais livres nas esferas magnéticas e aumentam a especificidade da ligação do exossomo.

Agora, complemente o tubo com uma amostra de biofluido rico em exossomos. Incubar o tubo com agitação. Os exossomos no biofluido exibem receptores de superfície específicos, que os ajudam a se ligar aos anticorpos ligados à superfície das esferas magnéticas.

Em seguida, coloque o tubo em um campo magnético. Sob a influência do campo magnético, os grânulos magnéticos ligados ao exossomo se ligam à superfície do tubo. Em seguida, usando uma micropipeta, aspire o biofluid