Ensaio baseado em bioluminescência celular: um método de alto rendimento para triagem combinatória de drogas

A bioluminescência celular é uma abordagem altamente sensível e rápida para a triagem em larga escala de medicamentos anticâncer.

Essa técnica usa células tumorais que expressam luciferase - uma enzima que catalisa uma reação química produtora de luz, fazendo com que as células hospedeiras brilhem no escuro. A intensidade da luminescência emitida é diretamente proporcional à densidade de células vivas.

Para começar, semeie as células que expressam luciferase em uma placa de cultura opticamente transparente revestida com uma matriz extracelular ou ECM e incuba.

Durante a incubação, a ECM promove a fixação das células ao poço de cultura.

Em seguida, pegue estoques concentrados da combinação de medicamentos e adicione diferentes volumes de meios de cultura para preparar a diluição em série da mistura de medicamentos.

Agora, remova o meio de cultura das células aderidas. Adicione diferentes diluições da combinação de medicamentos e incube.

Durante a incubação, a combinação de medicamentos atua sinergicamente nos alvos celulares.

Agora, remova o meio que contém o medicamento e adicione o meio fresco contendo luciferina.

A luciferina se difunde através da membrana e entra nas células. As