Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Pesquisa sobre o Câncer
0 visualizações • 2:37 min. • April 30th, 2023
Para criopreservar uma amostra de cérebro murino por congelamento, comece pegando um béquer cheio de solução de isopentano - um líquido altamente condutor - e mergulhe-o em um frasco contendo nitrogênio líquido.
Congele o isopentano até que a solução fique viscosa.
Enquanto isso, pegue uma amostra inteira do cérebro do camundongo prefixada em solução de sacarose. Este tratamento evita a deformação do tecido cerebral nas etapas subsequentes.
Remova a amostra de cérebro da solução de sacarose e seque-a para remover quaisquer vestígios de sacarose.
Em seguida, posicione o cérebro na orientação desejada em um criomold profundo contendo uma camada de meio de incorporação.
Sobreponha o cérebro no criomold com mais meios de incorporação para garantir que todo o órgão seja coberto.
Em seguida, mergulhe o criomold contendo o cérebro embutido no banho de isopentano pré-resfriado. O rápido resfriamento do tecido cerebral a uma temperatura ultrabaixa garante a retenção da arquitetura cerebral sem qualquer distorção.
Agora, deixe a amostra do cérebro congelar até que o meio de incorporação solidifique formando uma camada gelatinosa ao redor do cérebro, mantendo-o no lugar.
Depois de congelado,
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