Fixação e coloração de seção de tecido criopreservado: um procedimento para processar seções de tecido cerebral congelado para microdissecção a laser

Para diferenciar populações de células específicas em um tecido tumoral cerebral de camundongo heterogêneo para seu isolamento subsequente, comece pegando uma lâmina de vidro carregando a seção de tecido tumoral cerebral criopreservado de interesse.

Incubar sequencialmente o tecido em concentrações decrescentes de etanol. O etanol dissolve o meio de incorporação que penetrou no tecido e fixa o tecido, mantendo a integridade do ácido nucleico.

Além disso, o etanol reidrata o tecido, permitindo uma coloração uniforme durante as etapas subsequentes.

Agora, trate o tecido com violeta Cresyl. O violeta cresil - um corante básico - cora componentes celulares ácidos, como ácidos nucléicos.

Depois disso, contra-core o tecido com Eosina Y. A Eosina Y - um corante ácido - cora componentes celulares básicos, como proteínas citoplasmáticas.

Essa etapa de coloração diferencial ajuda a distinguir entre o citoplasma e outras estruturas celulares, permitindo a identificação de células de interesse.

Após a coloração, mergulhe o tecido em concentrações crescentes de etanol para desidratar o tecido e evitar distorção excessiva do tecido.

Em seguida, lave o lenço com xileno. O xileno desloca e remove