Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Pesquisa sobre o Câncer
0 visualizações • 4:02 min. • April 30th, 2023
As neuroesferas são agregados esféricos não aderentes de células precursoras neurais ou NPCs.
Quando plaqueados sob condições específicas de cultura aderente, os NPCs podem migrar espontaneamente para fora da neuroesfera.
Para avaliar a resposta migratória dos NPCs, primeiro, prepare uma suspensão de NPC da densidade desejada em um meio adequado.
Em seguida, semeie a suspensão celular em uma placa de cultura contendo meio e incuba.
Os fatores de crescimento específicos no meio suportam a proliferação de células. Além disso, a ausência de um substrato de revestimento mantém as células suspensas no meio, facilitando a formação de agregados de células 3D chamados neuroesferas.
Ao atingir o tamanho desejado, colete as neuroesferas.
Centrifugue e ressuspenda o pellet da neuroesfera no meio diluído.
Em seguida, coloque a suspensão da neuroesfera em uma placa revestida com matriz extracelular contendo meio diluído e incuba.
Durante a cultura, as neuroesferas aderem à matriz extracelular.
Com o tempo, devido aos constituintes da matriz extracelular, alguns NPCs começam a migrar para longe do núcleo da neuroesfera.
Agora, remova a mídia e conserte as células.
Capture imagens de contraste de
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos