Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Pesquisa sobre o Câncer
0 visualizações • 7:02 min. • April 30th, 2023
A barreira hematoencefálica, ou BBB, é uma barreira seletiva de células endoteliais e células cerebrais, como astrócitos, que regula o transporte de substâncias entre o sangue e o cérebro.
Para desenvolver um modelo BBB, inverta uma inserção de membrana em uma tampa de placa de cultura.
Semeie astrócitos sobre a membrana. Coloque a placa de cultura sobre o inserto e incuba.
Isso aprisiona os astrócitos entre a membrana e a superfície do poço.
Reverta a placa para trazer os astrócitos para o fundo e adicione um meio adequado ao poço.
Para a inserção, adicione células endoteliais que expressam proteínas de junção apertada ideais que aumentam os contatos célula a célula necessários para a formação da barreira.
Incubar para permitir que as células endoteliais adiram à membrana.
Remova o meio gasto e transfira o inserto para outro meio de astrócitos livre de fator de crescimento que contenha bem.
Posteriormente, adicione um meio de células endoteliais livres de fator de crescimento à inserção e incube.
A ausência de fatores de crescimento inibe a divisão celular, preservando os contatos célula a célula e estabilizando as propriedades de barreira.
As células endoteliais e os astrócitos i
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