Ensaio de permeabilidade mimetizada da barreira hematoencefálica: um ensaio in vitro para avaliar a permeabilidade do BBB Mimic a moléculas traçadoras

A barreira hematoencefálica, ou BBB, que consiste em células endoteliais, pericitos e astrócitos, regula o influxo e o efluxo de moléculas biológicas e ajuda a manter a homeostase cerebral.

Para avaliar a permeabilidade do modelo BBB in vitro, comece com um modelo BBB in vitro consistindo de células endoteliais aderidas no lado superior ou sanguíneo da inserção da membrana porosa e astrócitos aderidos no lado basal ou cerebral da membrana.

As células endoteliais com sua matriz extracelular entram em contato com os astrócitos, formando a mímica BBB.

Transfira o volume desejado de mídia do sangue e do lado do cérebro para uma placa preta de vários poços para uma medição de fluorescência ideal.

Substituir o meio do lado do sangue da cultura por um meio que contenha moléculas traçadoras fluorescentes de pequeno peso molecular.

Na cultura, os contatos das células endoteliais-astrócitos aumentam a barreira celular e estabilizam a barreira apertada, limitando a difusão de moléculas traçadoras para o lado cerebral da cultura.

Além disso, colete volumes adequados de mídia do sangue e do lado do cérebro nos pontos de tempo desejados. Substitua ambos os lados por mídia para manter o volume da