Preparação de andaime semeado MSC: uma técnica para preparar andaime semeado com células-tronco mesenquimais para implantação cirúrgica em modelo murino

As células cancerígenas produzem fatores quimiotáticos de homing para atrair as células-tronco mesenquimais ou MSCs dos vasos sanguíneos em direção ao local do tumor.

Para estudar o efeito dessas células no crescimento do tumor in vitro, comece usando um substrato de andaime esterilizado. Transfira-o para uma placa de poço contendo o meio desejado para pré-umedecer o andaime. Coloque-o em uma superfície seca para remover o excesso de mídia grudado no andaime para melhor adesão celular. Transfira o andaime parcialmente seco para um poço fresco. Semeie uma gota de suspensão de MSC no andaime.

Além disso, adicione mais meio nos cantos do poço para criar uma câmara de hidratação que evite a evaporação do meio da gota durante a incubação subsequente. Incube para permitir que as MSCs adiram à superfície do andaime. Vire o andaime para expor a superfície não semeada. Pipete uma nova gota de suspensão MSC deste lado e deixe os MSCs aderirem.

Depois que as MSCs aderirem a ambos os lados do andaime, cubra-o com mais meio, garantindo que todas as células estejam em contato com o meio. Incube até que as MSCs cresçam e se infiltrem nos interstícios e poros do andaime. O andaime semeado MSC está