Ensaio de invasão da neuroesfera de células-tronco tumorais cerebrais (BTSC): um ensaio in vitro para analisar o efeito do tratamento medicamentoso na invasão de BTSC da neuroesfera

As células-tronco tumorais cerebrais ou BTSCs - um subconjunto de células dentro dos tumores cerebrais - possuem capacidades de auto-renovação e contribuem para a progressão do tumor e resistência à terapia. Para determinar o efeito dos medicamentos na invasão de BTSC in vitro, comece com suspensões de BTSC em um meio adequado em frascos de cultura. Trate uma das suspensões com o medicamento de interesse.

Incubar os frascos. Os componentes do meio promovem a proliferação celular. As células permanecem em suspensão, formando aglomerados esféricos chamados neuroesferas. Ao atingir o tamanho desejado, colete as neuroesferas. Deixe-os sedimentar por gravidade e remover o meio. Em seguida, ressuspenda as neuroesferas não tratadas e tratadas com drogas em meio resfriado contendo uma proteína da matriz extracelular adequada e a droga.

Coloque as suspensões em uma placa de vários poços resfriada. Permita que as neuroesferas sedimentem até o fundo do poço para obter melhores imagens. Em seguida, incube para polimerização da proteína da matriz, incorporando as neuroesferas internas. Visualize as neuroesferas por um período prolongado usando microscopia de células vivas. Em cultura, as BTSCs