Dissecção do cerebelo e preparação de fatias: um método para gerar fatias de tecido a partir de cerebelo de camundongo

Em camundongos, o cerebelo está situado na base do prosencéfalo e consiste em dois hemisférios laterais unidos por uma linha média - vermis. O cerebelo, que contém a maioria dos neurônios do cérebro, é vital para estudos neurológicos.

Para gerar fatias de cerebelo, comece com uma cabeça de rato decapitada. Insira uma tesoura no forame magno - a abertura na base do crânio. Incise suavemente o crânio e remova-o. Em seguida, vire o cérebro e corte os nervos óptico e trigêmeo. Solte o cérebro em um meio de dissecação resfriado com o lado dorsal para cima. Separe o rombencéfalo das outras partes do cérebro.

Em seguida, corte os pedúnculos cerebelares subjacentes - a conexão entre o cerebelo e o tronco cerebral - para separar o cerebelo. Remova as meninges do cerebelo. Coloque cuidadosamente o cerebelo em uma plataforma picadora de tecidos perpendicular à lâmina picadora. Agora, disseque as fatias de tecido de espessura apropriada. Molhe imediatamente as fatias e transfira-as de volta para a placa de Petri contendo o meio de dissecação.

Separe e identifique as fatias do vermis. Transfira as fatias selecionadas para um recipiente de encaixe em uma placa de cultura contendo um meio de cult