Gerando Modelo Murino de Infarto do Miocárdio: Um Procedimento Cirúrgico para Ligadura Permanente da Artéria Coronária Descendente Anterior em Modelo de Camundongo

Para começar, prepare um camundongo anestesiado em decúbito dorsal. Faça uma incisão longitudinal em seu pescoço e desloque as glândulas salivares. Em seguida, separe a fáscia - uma camada de tecido conjuntivo ao redor dos músculos da cinta - para revelar a traqueia subjacente.

Pela boca, insira uma cânula de intubação e confirme a inserção traqueal precisa através da incisão. Conecte a cânula ao ventilador ajustado para os parâmetros desejados, que fornecem ventilação adequada ao mouse.

Agora, posicione o mouse em decúbito lateral direito. Incisar a pele entre os músculos peitorais esquerdos e separar a fáscia. Mude o ventilador para pressão expiratória final positiva ou configuração de PEEP.

Realize uma toracotomia do lado esquerdo no terceiro espaço intercostal - uma incisão feita entre a terceira e a quarta costelas. A pressão positiva nas vias aéreas durante o modo PEEP evita o colapso alveolar durante a toracotomia.

Depois de acessar o coração, remova o pericárdio. Identifique a artéria coronária descendente anterior esquerda ou LAD - um vaso vermelho brilhante que se ramifica da artéria coronária esquerda. A artéria LAD fornece sangue para a maior parte do ventrículo esquerdo.

Amarre cirurgicamente a artéria LAD proximal aos átrios esquerdos. Essa ligadura da artéria LAD causa empalidecimento do ventrículo. Feche a incisão. Devolva o animal à sua gaiola. A ligadura permanente da artéria LAD obstrui o fluxo sanguíneo e o suprimento de oxigênio para os músculos cardíacos, resultando em danos e morte.

Use um barbeador elétrico para raspar rapidamente um camundongo C57BL/6 macho anestesiado de 25 a 30 gramas na garganta e no lado esquerdo da caixa torácica. Confirme a falta de resposta ao beliscão do dedo do pé. Aplique pomada nos olhos do animal. Coloque o mouse em decúbito dorsal em uma almofada de aquecimento e coloque uma pequena compressa de gaze sob a cabeça para evitar superaquecimento dos olhos.

Prenda os membros com fita adesiva. Passe um laço de sutura de seda 5-0 sob os incisivos superiores e prenda a extremidade do laço na almofada de aquecimento para manter a boca aberta durante a canulação. Aplique o creme depilatório nas áreas pré-barbeadas e massageie suavemente com um cotonete por 1 minuto.

Retire o excesso de pêlo e creme com gaze e limpe a pele exposta com gotas de soro fisiológico a 0,9% e gaze. Aplique pedaços de gaze estéril na garganta e no tórax raspados e molhe a gaze com iodopovidona. Defina o ventilador em um volume corrente de 7 mililitros por quilograma e uma taxa de ventilação de 140 golpes por minuto.

Mova o mouse sob um estereomicroscópio de microcirurgia. Segurando a pele no centro da garganta, faça uma incisão de 0,5 centímetro ao longo da linha caudal/cefálica e separe os lobos da glândula salivar. Use uma pinça curva para separar suavemente a fáscia do músculo esterno-hióideo até que a laringe e a traqueia fiquem visíveis. Em seguida, prenda as bordas da abertura com afastadores presos a elásticos.

Em seguida, puxe suavemente a língua para o lado e use uma pinça para inserir a agulha interna embotada de uma cânula de calibre 16 na traqueia. Visualize uma inserção correta na traqueia através da incisão na garganta e conecte a cânula ao ventilador. Coloque solução salina estéril a 0,9% suplementada com gaze embebida em iodopovidona na incisão para manter os tecidos úmidos durante a operação.

Em seguida, coloque o tubo de exaustão na água. A presença de bolhas indica uma intubação bem-sucedida. Para a ligadura da artéria coronária descendente anterior esquerda ou LAD, mova cuidadosamente o mouse para a posição de decúbito do lado direito e prenda novamente o membro anterior esquerdo na nova posição.

Identifique a linha entre os músculos peitoral menor e maior esquerdo e faça uma incisão oblíqua de 1 centímetro na pele ao longo da linha. Usando uma microtesoura de dissecação romba, separe a fáscia dos músculos peitorais sem incisão nos tecidos e use afastadores presos a faixas elásticas para manter a separação.

Defina o ventilador com uma pressão expiratória final positiva de 3 centímetros de água. Use uma pinça romba para abrir a cavidade torácica no terceiro espaço intercostal entre a terceira e a quarta costelas. Coloque dois afastadores na caixa torácica, um em cada costela, e use uma pinça fina curva para remover cuidadosamente o pericárdio sem prejudicar o coração e os pulmões.

Localize a DA como uma linha vermelha brilhante superficial que vai da borda da aurícula esquerda em direção ao ápice. Use um porta-agulha para passar uma sutura de seda 7-0 sob o LAD, 2 a 3 milímetros abaixo dos átrios esquerdos. Puxando a seda lentamente para evitar rasgar o tecido cardíaco, amarre a ligadura com três nós. A parte inferior esquerda do ventrículo esquerdo ficará instantaneamente pálida após a ligadura.

Agora, solte os afastadores de costela e, segurando a terceira costela com uma pinça, faça duas passagens com a sutura de seda 6-0 sob a terceira e quarta costelas. Coloque três gotas de solução salina a 37 graus Celsius a 0,9% na abertura e feche o tubo de exaustão de expiração por 2 ou 3 ciclos respiratórios para inflar adequadamente os pulmões.

Aperte e prenda a sutura com dois arremessos e solte os afastadores que seguram os músculos, ajudando os músculos a retornar à sua localização anatômica correta. Em seguida, feche a pele torácica com dois pontos e dois lances de seda de sutura 5-0. Feche a pele da garganta com um ponto, uma sutura de seda 5-0 e dois arremessos.