Isolamento de bactérias comensais conjuntivais à base de swab: uma técnica para isolar bactérias comensais da conjuntiva do modelo murino

A conjuntiva do olho abriga bactérias comensais. Essa microflora indígena protege o olho de infecções, ativando as células imunológicas para atacar quaisquer micróbios nocivos que entrem nos revestimentos dos olhos.

Para isolar bactérias comensais, coloque um camundongo anestesiado em uma posição lateral. Pegue um cotonete estéril embebido em um meio adequado. Insira a ponta do cotonete úmido na região conjuntival medial do olho esquerdo. Pressione o globo ocular e mova o cotonete para frente e para trás ao longo da conjuntiva para coletar uma população comensal diversificada.

Remova o cotonete e mexa-o em um tubo contendo meio de enriquecimento microbiano. Esta etapa libera as bactérias aprisionadas da malha de algodão do cotonete para o meio. Descarte o cotonete e incube o tubo para facilitar o início do crescimento bacteriano.

Dispense algumas gotas do meio enriquecido inoculado com esfregaço ocular em uma placa de ágar sangue no padrão desejado e incuba. A caseína e as peptonas de soja presentes no meio fornecem nitrogênio necessário para a síntese de peptídeos, enquanto o cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico.

As bactérias comensais possuem enzimas hemolisina que diger