Estágio de fígado de camundongo com suporte de dispositivo de imagem para visualização vascular baseada em microscopia multifotônica: uma técnica de imagem assistida por dispositivo de estabilização para obter imagens multidimensionais de vasos sanguíneos no fígado de camundongo

A microscopia multifotônica permite a captura de imagens tridimensionais de alta resolução da vasculatura marcada com fluorescência dentro do tecido vivo. Comece com um camundongo anestesiado em decúbito dorsal.

Injete cuidadosamente uma suspensão de dextrano conjugado com fluoróforo em sua veia caudal. As moléculas injetadas fluem pela circulação e atingem órgãos como o fígado. O corante fluorescente marca o soro vascular, auxiliando na visualização dos vasos sanguíneos, enquanto o dextrano de alto peso molecular anexado evita seu vazamento da vasculatura.

Prepare a área abdominal do rato. Transfira-o para a base da estrutura de imagem de órgão equipada com um anel de sucção contendo lente de imagem conectado a uma bomba de vácuo. Incisar ao longo de sua borda esternal inferior para expor o fígado.

Guiando o anel de sucção para o fígado, aplique vácuo ou pressão negativa que facilita a adsorção do fígado para a lente no anel de sucção. Esta etapa reduz os artefatos de movimento durante a geração de imagens. Transfira a estrutura de imagem contendo o mouse para a platina do microscópio de varredura a laser multifóton.

Cubra a lente com solução salina, que atua como meio de imersão