Perfusão cardíaca retrógrada de Langendorff: uma técnica ex vivo para perfundir coração de camundongo isolado

Para começar, coloque um camundongo anestesiado em decúbito dorsal em uma placa de dissecação. Faça uma incisão para acessar a cavidade torácica e expor o coração. Localize a aorta e seus ramos - a artéria carótida comum esquerda e a artéria braquiocefálica. Passe essas artérias para isolar o coração.

Mergulhe imediatamente o coração excisado em uma placa de Petri contendo uma solução tampão oxigenada rica em nutrientes. Concomitantemente, insira uma cânula no coração de forma que sua ponta atinja a aorta ascendente. Use uma sutura para ligar a cânula. Conecte a cânula a uma seringa contendo solução de perfusão oxigenada.

Injete a solução de perfusão no coração. Esta etapa permite que o sangue saia das artérias coronárias e se derrame das veias pulmonares. Em seguida, conecte o coração canulado ao aparelho de Langendorff. Use a bomba peristáltica para realizar a perfusão a uma taxa de fluxo constante.

Nessas condições, o tampão se perfunde no coração. Isso cria pressão de canulação que fecha as válvulas aórticas, fazendo com que o tampão se mova pelas artérias coronárias. Eventualmente, o tampão perfunde os músculos cardíacos de forma retrógrada e depois se espalha pelas veias pulm