Modelo de pancreatite biliar aguda: um método para gerar modelo de camundongo com pancreatite biliar aguda por meio de infusão de ducto pancreático

O ducto pancreático transporta enzimas digestivas e se conecta com o ducto biliar comum próximo ao intestino. Esses dutos formam um canal onde os sais biliares ativam as enzimas digestivas antes de sair para o intestino.

Quando os cálculos biliares obstruem esse canal, a bile flui para trás, ativando enzimas digestivas no próprio pâncreas, levando à pancreatite biliar aguda - uma condição inflamatória grave. Para imitar essa condição em um modelo de camundongo, prepare um camundongo anestesiado na posição supina.

Incisar a parte superior do abdômen, abaixo do peito. Em seguida, puxe a porção superior do intestino delgado com o pâncreas e fixe suas extremidades laterais para acessar a região periampular - uma estrutura anatômica complexa que inclui a abertura do ducto pancreático.

Prenda as extremidades proximal e distal do ducto colédoco para evitar qualquer vazamento para outros órgãos. Em seguida, conecte uma seringa cheia de solução de taurocolato de sódio a uma bomba de infusão. O taurocolato de sódio é um sal biliar que ativa enzimas para a digestão de gorduras.

Agora, insira a agulha na região periampular e comece a perfundir na velocidade e concentração ideais pela duração desejada. Após a perfusão, remova a agulha e as suturas. Coloque o intestino de volta no peritônio.

Suturar a incisão. Permita que o mouse se recupere. Eventualmente, o taurocolato de sódio entra no pâncreas e ativa as enzimas digestivas, causando danos pancreáticos.

Depois de verificar a profundidade da anestesia com uma pitada no dedo do pé, limpe a área abdominal de um camundongo anestesiado com uma solução de iodopovidona a 5%. Usando um aparador, remova os pelos entre o tórax e a parte inferior do abdômen e limpe uma área cirúrgica de aproximadamente 2 centímetros quadrados com álcool 70%. Imobilize o animal na prancha cirúrgica e use uma tesoura para cortar 5 milímetros da pele horizontalmente na parte superior do abdômen e 1 centímetro abaixo do apêndice xifóide. Repita o corte no peritônio.

Para realizar a laparotomia com exposição mínima da cavidade, usando um trator puxe o fígado em direção à cabeça a aproximadamente 1 centímetro do intestino e localize a região do pâncreas e do duodeno. Usando uma pinça, levante o fígado em direção à cabeça do animal. Puxando suavemente a porção do intestino delgado, fixe as duas extremidades laterais com uma sutura de polipropileno 6-0 para uma melhor visualização da porção distal do tubo do ducto colédoco.

Usando um clipe de microvasos, oclua temporariamente o ducto colédoco proximal. Exponha o órgão para fora da cavidade abdominal. Em seguida, faça uma oclusão temporária do ducto colédoco distal com um 8-0 sutura. Para acessar o ducto colédoco, puncione a região periampular, que aparece como uma parte esbranquiçada da parede do intestino delgado, com uma agulha de 0,4 milímetro conectada a um tubo de polietileno de 0,54 milímetro. Inicie a bomba de infusão para infusão de solução de taurocolato de sódio a 2,5% a uma velocidade constante de 10 microlitros por 10 gramas de peso corporal por 3 minutos.

Após a infusão, remova o clipe de microvasos, o 8-0 temporário sutura e a agulha de injeção do ducto biliar pancreático. Suturar o abdômen com uma sutura de polipropileno monofilamentar não absorvente 6-0. O tempo entre a laparotomia e a sutura final não deve ser superior a 30 minutos. Após a cirurgia, alojar os animais em caixas de polietileno forradas com maravalha e água e comida ad libitum.