0 visualizações • 2:52 min. • July 8th, 2025
Embriões de camundongos são usados como sistemas modelo para estudar a embriogênese inicial de mamíferos. Para recuperar embriões de camundongos perinatais no estágio desejado de desenvolvimento embrionário, comece com um camundongo prenhe sacrificado em decúbito dorsal.
Em seguida, esterilize sua área abdominal e faça uma incisão transversal na parede abdominal para revelar os cornos uterinos subjacentes. Os cornos uterinos são longas estruturas tubulares contendo uma série de embriões. Agora, separe cuidadosamente os cornos uterinos do abdômen, extirpando-os do tecido circundante.
Transfira os chifres uterinos colhidos para um prato contendo tampão. Enxágue os chifres uterinos para remover detritos de tecido e sangue. Além disso, faça uma incisão entre os locais de implantação ao longo dos cornos uterinos para separar cada embrião. Extirpar a decídua, a camada placentária materna, juntamente com o disco placentário derivado do embrião.
Em seguida, remova a pequena estrutura membranosa extraembrionária ao redor do embrião que fornece nutrição a ele - o saco vitelino. Finalmente, remova a membrana amniótica - a membrana extraembrionária mais interna que consiste em um saco cheio de líquido que envolve e protege o embrião - para liberar o embrião de camundongo.
Os embriões perinatais recuperados podem ser usados para estudar o desenvolvimento inicial de mamíferos.
Limpe as tesouras e pinças de dissecação com etanol a 70%. Para coletar embriões perinatais em E18.5 ou E19.5, primeiro, eutanasiar camundongos prenhes usando inalação de dióxido de carbono. Em seguida, realize a luxação cervical de acordo com as diretrizes do NIH.
Em seguida, borrife etanol a 70% na superfície abdominal ventral do animal. Em seguida, usando a tesoura de dissecação estéril e fórceps, abra a cavidade abdominal eventualmente. Levante todo o útero e separe-o do corpo nas pontas dos chifres uterinos. Em seguida, enxágue todo o útero com 1x PBS em uma placa de Petri.
Corte o útero segmentalmente com uma tesoura de dissecação e remova a decídua placentária com uma pinça de dissecação para expor os embriões em sacos vitelinos. Remova o saco vitelino primeiro e, em seguida, remova a membrana amniótica com uma pinça de dissecação para liberar os embriões perinatais.