Isolamento de ovário de camundongo neonatal: um procedimento cirúrgico para colher par de ovários do modelo de camundongo neonatal

Para isolar ovários de camundongos neonatais, comece com um filhote de camundongo neonatal sacrificado em decúbito dorsal em uma plataforma cirúrgica. Faça uma longa incisão cirúrgica na pele e na parede do corpo para expor a cavidade abdominal. Em seguida, desloque suavemente os intestinos para revelar os chifres uterinos subjacentes.

Os cornos uterinos são duas longas estruturas tubulares que convergem no colo do útero e se estendem da bexiga em direção aos rins. Identifique os ovários - pequenas glândulas ovais - localizadas logo abaixo dos rins na ponta dos cornos uterinos, conectados através dos ovidutos.

Agora, corte o local de fixação do ovário de cada corno uterino para liberar os ovários. Transferir imediatamente os ovários excisados para uma placa de cultura estéril contendo meios pré-aquecidos adequados para manter a viabilidade dos ovócitos no tecido. Coloque a placa de cultura no aquecido stage de um microscópio de dissecação.

Usando uma agulha, remova cuidadosamente a bursa ovariana, um saco de tecido conjuntivo ao redor do ovário e quaisquer restos do oviduto. Finalmente, transfira os ovários para uma placa de vários poços contendo meio. Os ovários isolados podem ser