Isolamento de oócitos antrais de camundongos: um método para isolar oócitos antrais de ovários de camundongos recém-colhidos

Em um ovário de mamífero, oócitos totalmente crescidos derivados dos folículos antrais precisam apenas de um curto período de maturação em cultura, um fator crucial para a embriogênese in vitro. Esses oócitos são cercados por um aglomerado de células somáticas, que devem ser removidas por meio de desnudamento para facilitar a injeção de espermatozoides.

Para isolar oócitos antrais de camundongos desnudos, comece com um camundongo fêmea anestesiado pré-injetado com hormônio gonadotrofina sérica de égua grávida para estimular o crescimento folicular. Prepare o mouse e faça uma incisão na parte inferior do abdômen.

Exteriorize o intestino para revelar os ovários na parte superior das trompas uterinas em forma de V. Disseque um ovário. Transfira-o para um meio de cultura pré-equilibrado para manter a viabilidade dos oócitos. Sob um estereomicroscópio, identifique os folículos antrais por sua cavidade distinta cheia de líquido.

Usando uma agulha estéril, perfure os folículos antrais do ovário para liberar oócitos. Usando uma pipeta de diâmetro ideal, aspire cuidadosamente os oócitos para protegê-los de danos mecânicos. Evite aspirar células foliculares e outros detritos teciduais.

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