Imagem intravital: um método para observação em nível celular do pâncreas de camundongo através de uma janela de imagem estabilizada

A imagem intravital envolve a visualização de células de um animal vivo através de uma janela de imagem implantada no animal. Ele permite a observação a longo prazo da dinâmica celular sem comprometer suas funções.

Para começar, pegue um camundongo transgênico anestesiado previamente implantado com uma janela de imagem pancreática apoiada em uma placa de metal. A placa de base separa espacialmente o pâncreas do intestino, reduzindo assim os artefatos de movimento de movimentos fisiológicos, como o peristaltismo.

O camundongo transgênico expressa proteína fluorescente verde ou GFP sob o promotor do gene da insulina expresso em células beta de ilhotas no pâncreas.

Em seguida, segure a cauda do rato com firmeza e borrife desinfetante para remover quaisquer contaminantes da superfície. Insira um cateter na veia lateral da cauda. Injete uma solução contendo anticorpos marcados com uma sonda fluorescente vermelha na veia da cauda. Esses anticorpos se ligam às células que revestem os vasos sanguíneos, manchando-os de vermelho.

Agora, mude o mouse para uma configuração de microscopia intravital. Insira a janela de imagem pancreática no suporte da janela. Inicie a aquisição de imagens sob b