Modelo de perfusão anterógrada: uma técnica ex vivo para perfundir coração de camundongo isolado

Comece colocando um mouse anestesiado na posição supina. Disseque a cavidade torácica para visualizar o coração. Use um pipetador equipado com uma ponta de furo largo para aplicar pressão de sucção e aspirar o coração do corpo do rato para a ponta. Extirpar o coração na aorta para colhê-lo do corpo do camundongo.

Mergulhe o coração isolado em um béquer contendo um tampão rico em nutrientes suplementado com um agente anticoagulante. O anticoagulante no tampão forma um complexo com o cálcio presente nos cardiomiócitos - as células do músculo cardíaco, cessando a contração dos músculos cardíacos e impedindo a coagulação do sangue.

Em seguida, coloque o ápice do coração voltado para baixo em um suporte de coração mantido em uma placa de Petri contendo tampão adequado. Clampeie a aorta acima dos átrios e transfira o coração clampeado para uma placa de perfusão.

Em seguida, pegue um conjunto seringa-agulha contendo um tampão de perfusão apropriado. Insira a agulha no ventrículo esquerdo perfurando a câmara ventricular.

Com a aorta pinçada, a injeção intraventricular pressuriza as válvulas aórticas para abrir. Consequentemente, o tampão libera o sangue antegradamente através das artérias