Modelo de camundongo neonatal de ressecção apical: um procedimento cirúrgico para amputar o ápice ventricular para estudar o potencial regenerativo em um coração de camundongo recém-nascido

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A ressecção apical de um camundongo neonatal é um procedimento para remover o ápice ventricular esquerdo do coração. A lesão resultante ativa macrófagos cardíacos neonatais que promovem processos celulares para o reparo cardíaco. No entanto, essa capacidade regenerativa torna-se limitada na idade adulta, levando à insuficiência cardíaca. O transplante de macrófagos cardíacos neonatais para o coração adulto pode restaurar a função cardíaca.

Para começar, coloque um camundongo neonatal no gelo para induzir a hipotermia que entorpece o camundongo. Transfira e prepare o rato inconsciente em uma plataforma cirúrgica. Agora, sob um estereoscópio, faça uma incisão horizontal no lado esquerdo do tórax e separe os músculos subjacentes para visualizar o coração.

Aplique pressão no tórax e no abdômen para exteriorizar o coração. Corte cuidadosamente o tecido do ápice ventricular até que o sangramento exponha a câmara ventricular esquerda. Usando um cotonete, pressione o coração de volta para a cavidade torácica. Suturar a parede torácica incisada. Aplicar cola de tecido para unir a pele. Em seguida, transfira o mouse para um cobertor de aquecimento para interromper a hipotermia. Em seguida, mude o camundongo neonatal operado para a gaiola da mãe para uma recuperação rápida.

Após a ressecção apical, os macrófagos cardíacos residentes se acumulam no local lesado. Posteriormente, esses macrófagos podem ser isolados para transplante no coração adulto.

Comece pré-resfriando a plataforma operacional de bronze durante a noite a menos 20 graus Celsius. Retire o rato anestesiado da geladeira e coloque-o na plataforma. Prenda o mouse em decúbito dorsal usando fita adesiva médica. Coloque a plataforma operacional com o mouse sob um estereoscópio e desinfete o peito do mouse usando uma almofada de preparação embebida em betadine e álcool 70%.

Incisar a pele com um corte de 1 centímetro na quarta área intercostal da cavidade torácica e separar os músculos intercostais usando uma tesoura microcirúrgica até que o coração seja acessado. Pressione alternadamente o tórax e o abdômen com a ajuda de duas pinças até que o coração seja exteriorizado para fora do tórax, sem nenhum dano mecânico.

Coloque as costelas abaixo e acima da pequena incisão como uma fixação natural para imobilizar o coração. Localize o ápice do ventrículo esquerdo e corte um diâmetro de 1 milímetro de tecido do ápice ventricular usando uma tesoura de iridectomia. Confirme se a câmara ventricular esquerda está exposta e começa a escorrer.

Pressione suavemente o coração de volta para a cavidade torácica usando um cotonete. Suturar os músculos, costelas e pele usando 8-0 suturas de prolina e limpe bem o mouse após a operação. Transfira o mouse da plataforma de operação para um cobertor de aquecimento de 37 graus para aquecer o corpo imediatamente após a operação.

Confirme a anabiose do camundongo observando os sinais de restauração espontânea da respiração, mudança da cor da pele de pálido para rosa e movimento dos membros. Leve o camundongo operado de volta para sua mãe, uma vez que ele tenha se recuperado. Misture o camundongo operado e os materiais de nidificação de sua mãe, se necessário.