Modelo de Geração de Infecção do Trato Urinário: Uma Técnica para Administrar Bactérias Uropatogênicas em Camundongos para Desenvolver Modelo de Infecção do Trato Urinário

A infecção do trato urinário, ou ITU, é causada principalmente pela colonização da bactéria E. coli uropatogênica nos rins, ureteres, bexiga ou uretra.

Para gerar um modelo murino de ITU, comece colocando um camundongo anestesiado na posição supina. Usando um estereomicroscópio, visualize a região abdominal inferior do camundongo para localizar a abertura uretral rosa profunda.

Agora, pegue uma seringa contendo a solução bacteriana uropatogênica desejada com uma ponta de angiocateter conectada a ela. Insira o cateter perpendicularmente na uretra. Incline a seringa para posicioná-la horizontalmente e empurre-a ainda mais até atingir a bexiga urinária.

Em seguida, instilar lentamente o inóculo bacteriano na bexiga. Mantenha a seringa e o cateter no lugar durante o período desejado para evitar vazamentos. Retraia o cateter lentamente da uretra e permita que as bactérias proliferem.

Uma vez dentro, a população bacteriana invade as células epiteliais superficiais da bexiga, onde se replicam para formar comunidades bacterianas intracelulares, ou IBCs, no citoplasma dessas células.

Eventualmente, essas bactérias são liberadas no lúmen da bexiga, onde infectam as células próximas, causando a disseminação da infecção.

O modelo murino da UTI está agora pronto para análises posteriores a jusante.

Monte uma ponta de angiocateter estéril de calibre 24 em uma seringa de 100 microlitros. Encha a seringa com a solução bacteriana preparada. Coloque um animal em uma superfície de trabalho em decúbito dorsal e mantenha uma anestesia estável com isoflurano, usando um cone nasal durante a instilação. Aplique a pomada para os olhos. Expulse a urina residual aplicando uma compressão suave e fazendo movimentos circulares na região suprapúbica. Em seguida, limpe a parte inferior do abdômen com etanol a 70%.

Lubrifique a ponta do cateter com solução salina normal. Coloque o dedo indicador da mão não dominante no abdômen e empurre-o suavemente para cima. Inicie o cateterismo da uretra verticalmente em um ângulo de 90 graus. Assim que a resistência for encontrada, incline-a horizontalmente antes de inseri-la ainda mais. Realize uma instilação lenta de 50 microlitros do inóculo bacteriano. Após a instilação, mantenha a seringa e o cateter no lugar por mais alguns segundos e, em seguida, retraia lentamente para evitar vazamentos.