Biópsia de pinça guiada por colonoscopia em um modelo de camundongo: uma técnica para visualizar e extrair amostras de tecido do cólon de camundongo

Em condições patológicas, a colonoscopia permite a visualização do cólon e a extração de tecido por biópsia por pinça para análise detalhada de feridas inflamatórias.

Para realizar a biópsia de pinça guiada por colonoscopia em um camundongo, comece com um conjunto de biópsia. O conjunto contém uma unidade conectora, uma bainha de endoscópio com um colonoscópio pré-inserido de diâmetro ideal. O colonoscópio é conectado a uma fonte de luz, uma fonte de vídeo, uma porta de gás e uma porta de instrumento para pinça de biópsia.

Em seguida, prepare um camundongo anestesiado em decúbito ventral na plataforma de colonoscopia. Puxe a cauda para cima e use uma agulha de gavagem para infundir o ânus com um tampão adequado para lavar qualquer matéria fecal. Em seguida, insira o colonoscópio no ânus e avance-o para o reto. Continue movendo o colonoscópio mais em direção ao cólon enquanto bombeia gás para mantê-lo inflado.

Em seguida, dirija a pinça para fora da porta do instrumento e abra as garras. Gire a pinça em um ângulo reto para induzir uma ferida de profundidade ideal. Feridas muito superficiais ou muito profundas resultam em uma ferida superficial ou perfuração do cólon, respectivamente. Depois disso, usando uma pinça de biópsia, retire o tecido do cólon. O tecido extraído e a ferida induzida podem ser analisados posteriormente para entender a fisiopatologia.

Antes de iniciar o procedimento, insira um endoscópio de furo rígido de 1.9 milímetro em uma bainha de endoscópio e conecte o endoscópio montado à fonte de luz e ao dispositivo de imagem de vídeo de acordo com as instruções do fabricante. Use a tubulação fornecida para conectar a bomba de ar à válvula de gás no lado esquerdo da bainha, próximo ao canal de trabalho.

Certifique-se de que o canal de trabalho esteja na posição aberta e insira uma pinça de biópsia de 3 Fr através do canal de trabalho. Avance a pinça até o final da bainha sem sair da bainha.

Em seguida, coloque o camundongo anestesiado em uma plataforma de estadiamento endoscópica em seu lado ventral e confirme o nível apropriado de sedação por falta de resposta ao reflexo pedal. Depois de aplicar a pomada para os olhos, encha uma seringa de 3 mililitros com uma agulha de gavagem de rato conectada com PBS em temperatura ambiente e insira a agulha aproximadamente 1 centímetro no ânus do camundongo. Infundir suavemente com PBS até que o material fecal tenha sido eliminado. Vários pellets fecais devem sair do camundongo junto com o PBS que foi infundido.

Insira o endoscópio montado 0,5 centímetros no ânus e avance a pinça de biópsia para o lúmen limpo do reto até que as 'mandíbulas' completas da pinça estejam além da extremidade da bainha. Gire a pinça 90 graus para que as mandíbulas se abram na orientação leste-oeste, abra as pontas e avance a pinça aproximadamente 1 centímetro, fechando e retraindo a pinça em um movimento rápido e suave para colher a biópsia. Para evitar a insuflação total do cólon durante a realização da biópsia, deixe o lado direito da válvula de gás aberto.