Modelo de Córnea Ex vivo de Ceratite Bacteriana em Suínos: Uma Técnica para Estabelecer Infecção Bacteriana em Células Epiteliais da Córnea

No olho dos vertebrados, a córnea - a cobertura protetora mais externa - é infectada por Pseudomonas aeruginosa, resultando em uma condição inflamatória da córnea - ceratite.

Para estabelecer um modelo de ceratite da córnea ex vivo, coloque um botão corneoescleral do olho suíno em uma placa de Petri. Este segmento de tecido consiste na córnea cercada por restos de esclera - a cobertura fibrosa do olho. Complemente a placa de Petri com meios contendo antibióticos para eliminar micróbios contaminantes da superfície epitelial da córnea.

Localize a porção central da córnea. Faça incisões superficiais horizontais e verticais no padrão desejado, perfurando a camada epitelial mais externa da córnea. Transfira o tecido incisado, com o lado da córnea para baixo, para um molde oco especializado.

Encha a cavidade da córnea com ágar liquefeito e deixe solidificar, restringindo o tecido dentro do molde. Inverta o molde para expor a superfície ferida do epitélio da córnea. Pipetar a suspensão de Pseudomonas nas áreas incisas da córnea. Cubra o molde com mais meio de crescimento para um crescimento bacteriano ideal. Complemente a placa de cultura com meio e incuba.

As bactérias atravessam a incis