JoVE Encyclopedia of Experiments
Biologia
0 vistas • 3:03 min • July 8th, 2025
Os porcos têm pulmões multilobados - um órgão emparelhado da respiração - ao redor do coração dentro da cavidade torácica. A traqueia permite a passagem de ar de e para os pulmões. Ele se ramifica em duas vias aéreas principais ou brônquios, levando aos pulmões.
Dentro dos pulmões, os brônquios se dividem em vias aéreas progressivamente menores, e os menores ramos terminais das vias aéreas são chamados de bronquíolos. Os bronquíolos levam a minúsculos sacos de ar em forma de balão chamados alvéolos, que são os locais de troca gasosa dentro dos pulmões.
Para isolar seções de tecido bronquiolar, comece colocando pulmões suínos recém-colhidos em uma plataforma estéril. Esterilize a superfície ventral da pleura - estrutura membranosa fina que reveste os pulmões - para eliminar os contaminantes da superfície do tecido. Esta etapa também facilita a incisão da pleura nas etapas subsequentes.
Incisar ao longo do comprimento do pulmão e extirpar o tecido circundante para expor a cartilagem do brônquio. Além disso, faça uma incisão transversal no ponto mais alto do brônquio para separá-lo da traqueia.
Segurando a extremidade livre do brônquio, separe suavemente o comprimento do brônquio com os bronquíolos do tecido alveolar circundante. Enxágue a seção bronquiolar excisada com um meio adequado. A seção de tecido bronquiolar está pronta para mais experimentações.
Obtenha os pulmões imediatamente após o abate e transporte-os para o laboratório em uma caixa térmica doméstica. Trabalhe em uma superfície esterilizada e sob uma chama. Coloque os pulmões em uma tábua de cortar de plástico limpa coberta com papel alumínio autoclavado e verifique se os bronquíolos permanecem intactos. Os pulmões não são adequados para uso se houver algum dano no matadouro ou durante o transporte.
Aqueça uma espátula sob uma chama e toque brevemente a faca na área do pulmão ao redor do bronquíolo para esterilizar a superfície do tecido. Corte o tecido superficial ao redor do bronquíolo usando uma lâmina de barbear estéril, fazendo incisões paralelas ao bronquíolo para evitar qualquer dano.
Uma vez que o bronquíolo tenha sido exposto, faça uma incisão transversal através do bronquíolo no ponto mais alto visível. Usando uma pinça estéril, segure levemente a extremidade livre do bronquíolo e corte qualquer tecido indesejado restante usando uma lâmina de barbear estéril. Faça uma incisão transversal final no bronquíolo antes que qualquer ramificação seja visível para remover o bronquíolo dos pulmões.
Este artigo detalha a estrutura anatômica dos pulmões suínos e fornece um protocolo para o isolamento de seções de tecido brônquio. A metodologia garante a integridade do tecido para experimentações posteriores.
A extração confiável de tecido bronquiolar íntegro de pulmões suínos permite o desenvolvimento de modelos de infecção ex vivo fisiologicamente relevantes para a descoberta de fármacos respiratórios. Essa capacidade apoia a validação precoce de alvos e a redução de riscos mecanicistas na pesquisa de infecções pulmonares crônicas, particularmente para patógenos como Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus. A preparação padronizada de tecidos aumenta a confiabilidade preditiva e a continuidade translacional em fluxos de trabalho pré-clínicos.
Este protocolo de extração de tecido se insere na interface entre a descoberta inicial e o desenvolvimento de modelos pré-clínicos, permitindo a criação de modelos de infecção robustos para triagem posterior e pesquisas translacionais.
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Última atualização: 29 agosto 2026