Modelo de biofilme de pulmão de porco ex vivo: uma técnica para desenvolver modelo de pulmão para estudar biofilmes bacterianos em tecido bronquiolar de porco

Os bronquíolos são as vias aéreas tubulares dos pulmões. Durante a infecção crônica, os bronquíolos ficam entupidos devido ao acúmulo de muco. O muco rico em nutrientes fornece um ambiente adequado para o crescimento de bactérias oportunistas. Essas bactérias são incorporadas em uma matriz polimérica extracelular autoproduzida e proliferam para formar um biofilme.

Para imitar o desenvolvimento de biofilme bacteriano nos pulmões, pegue uma amostra de tecido bronquiolar de porco em uma placa de Petri. Disseque o tecido em pedaços da forma desejada. Adicione um meio de cultura de biofilme à placa de Petri. Esterilize o prato sob luz ultravioleta para remover quaisquer contaminantes da superfície.

Transfira os pedaços de tecido esterilizado para uma placa multipoços contendo meio de cultura de biofilme e almofadas de agarose, que servem como um substrato ideal para a adesão bacteriana. Em seguida, pique uma ponta de agulha contendo uma colônia das bactérias desejadas em cada pedaço de tecido para introduzir bactérias planctônicas no tecido. Sele a placa com uma membrana porosa esterilizada por UV que facilita a troca uniforme de oxigênio em toda a superfície da placa. Incube a placa se