Cultura do Segmento Ocular Anterior: Um Método para Cultura de Córnea com Segmento Anterior do Olho Suíno

Para cultura do segmento ocular anterior, comece com uma placa de cultura adequada. A placa de cultura tem um estágio elevado no centro, conectado a duas portas de fluido para entrada e saída.

Primeiro, coloque um segmento ocular anterior suíno fresco contendo córnea sobre o palco. Em seguida, coloque um anel de fixação sobre o segmento do olho e prenda-o. Em seguida, prepare uma configuração de perfusão composta por uma seringa cheia com um meio de cultura adequado. Conecte a seringa a uma válvula, filtro e tubo com um cubo de agulha dobrado na outra extremidade.

Prepare uma configuração de reservatório montada de forma semelhante usando uma seringa vazia. Agora, conecte os cubos da agulha da perfusão e a configuração do reservatório às portas de entrada e saída, respectivamente. Perfunda suavemente a mídia e deixe o segmento anterior inflar.

Continue a perfusão e deixe as bolhas e o excesso de meio fluir para o reservatório. Em seguida, incubar a placa de cultura na altura desejada e nas condições fisiológicas padrão. Isso resulta em um modelo tridimensional que simula a complexa arquitetura do olho em condições fisiológicas.

Conecte um transdutor de pressão à válvula reservatóri