JoVE Encyclopedia of Experiments
Biologia
0 vistas • 2:58 min • July 8th, 2025
Comece preparando um porco anestesiado em uma posição lateral. Flexione as costas do animal para expandir os espaços intervertebrais. Agora, faça uma incisão dorsal na linha média ao longo da região toracolombar.
Incise os músculos ao redor das vértebras torácicas. Em seguida, retraia os músculos de ambos os lados da coluna vertebral para expor os processos espinhosos e a lâmina.
Agora, remova a lâmina - uma pequena seção do osso espinhal entre a décima terceira e a décima quarta vértebra torácica. Isso cria um espaço entre as vértebras. Insira um cateter de veia nesta lacuna. Este procedimento perfura a medula espinhal e posiciona o cateter venoso lateralmente na coluna.
Remova a agulha embutida do cateter e substitua-a por uma sonda de agulha Doppler a laser. Em seguida, conecte a sonda ao hardware Doppler a laser e ao sistema de aquisição. Este sistema permite a avaliação em tempo real da velocidade do fluxo sanguíneo nos microvasos da medula espinhal.
Inicie a máquina Doppler a laser para permitir que a luz de uma fonte de laser monocromática de baixa energia ilumine a área de interesse. Quando a luz colide com os glóbulos vermelhos em movimento, há uma mudança em sua frequência chamada deslocamento Doppler. A mudança média de frequência do Doppler corresponde à velocidade com que os glóbulos vermelhos se movem. Esta técnica pode ajudar a determinar o fluxo sanguíneo prejudicado na lesão da medula espinhal.
Depois de confirmar um nível adequado de sedação em um porco de 40 kg de três meses de idade, coloque o animal na posição lateral correta e flexione as costas do animal para ampliar o espaço entre as vértebras. Exponha cirurgicamente a área paravertebral para a preparação de processos espinhosos em arcos vertebrais e coloque um cateter vascular de veia periférica de calibre 14 paramediano na medula espinhal ao nível das vértebras torácicas 13/14 ou vértebras lombares 1/2 entre dois arcos vertebrais.
Substitua a agulha pela sonda de agulha Doppler a laser e conecte a sonda ao disco rígido e ao software designados para testar a qualidade do sinal. Um sinal estável com pulsatilidade moderada deve ser observado. Fixe cuidadosamente a sonda com suturas e use acolchoamento para evitar que a sonda se desloque ou dobre.
Este artigo detalha um procedimento cirúrgico para inserir uma sonda agulha de Doppler a laser na medula espinhal de um porco anestesiado para avaliar a velocidade do fluxo sanguíneo. O método tem como objetivo avaliar o fluxo sanguíneo prejudicado em lesões da medula espinhal.
A quantificação em tempo real do fluxo sanguíneo da medula espinhal utilizando sondas agulha a laser Doppler permite uma avaliação precisa da perfusão microvascular em modelos animais de grande porte. Essa capacidade é fundamental para reduzir os riscos associados a hipóteses translacionais em lesões medulares e reforça a confiança preditiva na seleção de modelos pré-clínicos. A técnica orienta decisões iniciais de portfólio ao fornecer dados fisiológicos acionáveis relevantes para a validação de alvos neurovasculares.
Essa técnica integra-se ao continuum de descoberta a pré-clínico ao fornecer dados fisiológicos em tempo real em um modelo suíno, conectando estudos mecanicistas iniciais e pesquisas translacionais.
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Última atualização: 29 agosto 2026