Isolando Artérias Ciliares Posteriores Curtas: Um Protocolo para Extirpar Microvasos Ciliares Posteriores Curtos Intactos de Olho Suíno

O globo ocular recebe seu suprimento sanguíneo principalmente da artéria oftálmica. À medida que a artéria oftálmica passa ao longo do nervo óptico, ela se ramifica, formando várias artérias ciliares posteriores curtas, ou SPCAs.

Na parte posterior do globo ocular, a SPCA se bifurca em dois tipos de ramos. Os ramos paraópticos entram na esclera - a cobertura ocular mais externa - perto do nervo óptico. Em contraste, as SPCAs distais perfuram a esclera a uma curta distância do nervo óptico.

Para isolar SPCAs, pegue um olho suíno recém-dissecado com o nervo óptico e restos de tecido extraocular ligados a ele. Mergulhe o globo ocular em uma câmara de dissecção contendo um tampão fisiológico adequado.

Disseque as camadas musculares circundantes para visualizar as artérias ao redor do globo ocular. Faça uma incisão circunferencial completa no globo ocular para separar o olho nas metades anterior e posterior. Remova a camada vítrea da metade posterior do olho.

Visualize a metade posterior do olho para localizar o nervo óptico e a vasculatura retrobulbar adjacente - os vasos sanguíneos atrás do globo ocular. Localize os ramos paraópticos e distais das artérias ciliares posteriores curtas.

Extirpar esses segmentos arteriais e lavá-los com o tampão desejado para remover contaminantes e sangue residual. Armazene SPCAs para análise posterior a jusante.

Olhos suínos frescos, juntamente com nervo óptico e tecidos extraoculares, foram obtidos do abatedouro local imediatamente post-mortem. Coloque o globo ocular em uma câmara de dissecção contendo tampão Krebs-Henseleit gelado. Corte cuidadosamente os músculos e tecidos circundantes com uma tesoura Mayo afiada.

Faça uma incisão com um bisturi e corte o globo ao longo do plano equatorial com uma tesoura Mayo afiada até que o olho seja separado nas metades anterior e posterior. Remova o máximo possível de corpo vítreo da metade posterior do olho usando um par de pinças de padrão padrão.

Depois de usar pinos de dissecção para fixar cuidadosamente a metade posterior do olho, corte suavemente o tecido conjuntivo ao redor do nervo óptico para expor a vasculatura retrobulbar subjacente com uma tesoura de mola Student Vannas.

Isole o par de artéria ciliar posterior curta óptica e distal junto com os tecidos conjuntivos circundantes com um par de pinças de precisão tipo 5 e tesouras de capsulotomia Vannas. Remova suavemente os tecidos conjuntivos dos segmentos arteriais usando pinças e tesouras de ponta extra fina antes de enxaguar as artérias isoladas em PBS gelado para remover contaminantes e resíduos de sangue.