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Para gerar um modelo de infecção óssea bacteriana, comece colocando um coelho anestesiado em posição lateral. Remova o pelo do membro posterior para localizar a tíbia - o osso que conecta o joelho ao tornozelo. Marque um ponto adjacente ao platô tibial - a extremidade proximal do osso da tíbia.
Incisar a pele e o periósteo - uma camada de tecido ao redor do osso - expondo a tíbia. Usando a referência marcada, faça uma cavidade na medula óssea. Insira um tampão de cera óssea na cavidade. Suturar o periósteo e as camadas da pele.
Em seguida, pegue uma seringa contendo solução de Staphylococcus aureus. Perfure a agulha através do tampão de cera óssea e inocule a solução bacteriana na medula óssea. Ejete a agulha. Transfira o coelho para uma gaiola e monitore a propagação da infecção.
O tampão de cera óssea evita o vazamento da suspensão bacteriana, permitindo que a bactéria prolifere na medula óssea. Essas bactérias atraem os leucócitos e fatores inflamatórios que levam à osteomielite - uma inflamação no osso que causa redução do suprimento sanguíneo.
Essas condições eventualmente levam à formação de sequestro - uma área necrótica no osso desprovida de suprimento sanguíneo. As bactérias se infiltram ainda mais nessa área para escapar do tratamento com antibióticos, resultando em uma infecção crônica.
Para configurar o molde de infecção óssea, confirme a falta de resposta ao beliscão da pata em um coelho branco da Nova Zelândia macho de três meses e 3 quilos de idade e use um barbeador elétrico para remover os pelos da região tibial proximal na direção contrária ao crescimento dos pelos. Desinfete a pele exposta com solução de iodopovidona e use uma caneta e uma régua para marcar a extremidade superior da tíbia e a posição do orifício de perfuração para a injeção de S. aureus, tomando cuidado para que a posição do orifício de perfuração seja no meio horizontal do platô tibial.
Em seguida, use um bisturi #11 para fazer uma incisão na pele, seguida de uma incisão de 1 centímetro no peritônio. Usando uma unidade de perfuração óssea elétrica, faça um orifício de 2 milímetros de diâmetro na tíbia e pressione o orifício com um cilindro de cera óssea de 2 milímetros de diâmetro e 2 milímetros de comprimento. Remova qualquer cera óssea sobressalente ao longo do plano horizontal do planalto tibial e confirme se o orifício está cheio de cera óssea.
Em seguida, use suturas cirúrgicas absorvíveis para costurar o periósteo e a pele, em uma sutura vertical em colchão para evitar que o animal mastigue os pontos, e use um injetor de assepsia de 1 mililitro para injetar lentamente 1 x 108 UFC/mL de solução de S. aureus no furo.