Transferência de embriões para coelhos: um procedimento para transferência de embriões guiada por laparoscopia para oviduto de modelo de coelho fêmea receptora ovulante

Para realizar a transferência de embriões, pegue uma corça de coelho não fertilizada. Injete no coelho por via intramuscular um análogo sintético do hormônio liberador de gonadotrofina. Este procedimento induz a ovulação e permite que o coelho exiba pseudogravidez - uma condição em que o corpo apresenta sintomas semelhantes aos da gravidez sem ter um feto viável, o que aumenta as chances de sobrevivência do embrião nas etapas subsequentes.

Anestesie o coelho e coloque-o em decúbito dorsal, em posição inclinada com os pés elevados acima da cabeça. Essa posição desloca os órgãos abdominais para cima, garantindo espaço suficiente para os órgãos reprodutivos. Faça uma abertura na porção anterior da região abdominal. Use esta área para inserir uma câmera endoscópica dentro da cavidade peritoneal para visualizar o sistema reprodutivo.

Agora, pegue um conjunto seringa-cateter contendo embriões viáveis. Insira a agulha perto do oviduto – um canal que passa o embrião em direção ao útero. Avance o cateter através da extremidade da cavidade em forma de funil ou infundíbulo até atingir a ampola - uma posição tubular longa do oviduto.

Libere os embriões na ampola. Retraia o cateter e remova a câmera. Sele o local da incisão. Transfira o coelho para sua gaiola e monitore-o. Os embriões migram da região ampular em direção ao corno uterino – a parte do útero onde ocorre a implantação. Embriões saudáveis são implantados, levando a uma gravidez bem-sucedida.

No dia da transferência, enxágue os embriões frescos ou descongelados em meio de base a 37 graus Celsius sob um microscópio estéreo e conecte um cateter peridural de calibre 17 adequadamente configurado a uma seringa de 1 mililitro. Aspire um centímetro de meio de base no cateter, seguido por uma pequena bolha de ar. Em seguida, aspire 5 a 7 embriões e 10 microlitros de meio base, seguido por outra pequena bolha de ar em um centímetro final de meio base.

Depois que os embriões forem carregados, coloque um coelho receptor anestesiado em uma gaiola em um estágio de aquecimento e aplique pomada nos olhos do animal. Depois de confirmar a falta de resposta ao reflexo pedal, raspe o pelo do abdômen ventral, limpe a área cirúrgica com sabonete de gluconato de clorexidina e remova os pelos restantes.

Cubra a área com um campo estéril com um orifício para a área cirúrgica e insira um trocarte endoscópico de 5 centímetros na cavidade abdominal, 2 centímetros caudais ao apêndice xifóide e use um insuflador mecânico regulador de pressão para inflar a cavidade peritoneal.

Insira a câmera do endoscópio através do trocarte endoscópico e insira a agulha peridural de calibre 17 na região inguinal a 2 a 3 centímetros do infundíbulo. Insira o cateter carregado através da agulha peridural no abdômen e insira 1 a 2 centímetros do cateter peridural através do infundíbulo na ampola.

Pressione suavemente o êmbolo do cateter para liberar os embriões no oviduto. Ambas as bolhas de ar devem sair do cateter. Remova o cateter logo após a liberação dos embriões e aspire e libere o meio restante para confirmar a ausência dos embriões.

Depois de confirmar a transferência bem-sucedida dos embriões, remova a agulha peridural e a câmera do endoscópio e libere o dióxido de carbono abdominal através do trocarte endoscópico. Limpe a incisão do trocarte com solução de clorexidina e feche a ferida com um alumínio micronizado e um curativo de plástico. Em seguida, trate o animal com os antibióticos e analgésicos apropriados e monitore o animal até a recuperação total.