Coloração com vermelho do Nilo: uma técnica para detectar e quantificar lipídios neutros intracelulares em algas

As algas são organismos fotossintéticos aquáticos que produzem uma variedade de lipídios, dos quais os lipídios neutros são essenciais para a produção de biodiesel.

Para detectar e quantificar lipídios neutros, misture um volume ideal de suspensão de algas e etanol em uma placa de microtitulação preta. A parede celular e a membrana das algas, que impedem a penetração da maioria das manchas, tornam-se permeáveis quando expostas ao etanol. Em seguida, combine o etanol com um corante fluorescente lipossolúvel - vermelho Nilo. Adicione esta mistura ao poço que contém algas.

Colocar a placa de microtitulação num espectrofotómetro. Defina um programa que garanta a incubação com agitação intermitente para facilitar a interação entre o corante e as algas.

Como o vermelho do Nilo é hidrofóbico, ele não pode atravessar facilmente o citoplasma. Solventes como o etanol, quando acoplados ao vermelho do Nilo, mobilizam o corante e o ajudam a atingir os corpos lipídicos dispersos no citoplasma. O vermelho do Nilo então penetra nos corpos lipídicos e se solubiliza lá, corando os lipídios.

As células deficientes em lipídios aparecem como anéis fluorescentes com corpos escuros, enquanto as células r