Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 3:14 min. • July 8th, 2025
Para coloração específica do citoplasma celular em microambientes de tecidos moles, obtenha um rim de camundongo recém-colhido. Trate-o com uma solução fixadora contendo formaldeído, ácido acético glacial e metanol. Incubar a baixas temperaturas.
O formaldeído penetra nas células, reticulando proteínas com proteínas e proteínas com ácidos nucléicos. O metanol desloca a água do tecido e coagula as proteínas. O ácido acético causa acidificação intracelular e inchaço do tecido, neutralizando assim o encolhimento do tecido causado pelo metanol.
A fixação inativa as enzimas e estabiliza a morfologia do tecido para coloração subsequente. Remova o excesso de fixadores usando tampão. Incube o tecido com eosina Y, um corante ácido.
A eosina penetra nas células fixas e entra no citoplasma. O ambiente ácido do citoplasma, proveniente do tratamento com ácido acético, causa protonação máxima de grupos amino de proteínas citoplasmáticas.
A eosina, com grupos funcionais carregados negativamente, interage eletrostaticamente com grupos protonados de proteínas, formando um complexo corante-proteína estável, e cora o citoplasma de rosa após o acúmulo. Após a incubação, corte o rim corado em pequenos
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos