Coloração Safranin-O: Um Método para Visualizar a Integridade Estrutural e a Celularidade da Cartilagem

Para coloração de cartilagem, comece com uma seção de cartilagem fixada em formalina e embebida em parafina de um camundongo sacrificado.

Primeiro, mergulhe a amostra no substituto do xileno - um agente de limpeza não perigoso que remove a cera de parafina e expõe o tecido desidratado. Em seguida, trate a amostra com concentrações decrescentes de etanol para reidratar o tecido para posterior coloração.

Agora, core a amostra com hematoxilina de ferro de Weigert - uma mancha orgânica contendo íons ferrosos - e incube brevemente. As moléculas de hematoxilina formam complexos com íons ferrosos e penetram na célula. Os íons ferrosos atuam como mordentes e facilitam a ligação da hematoxilina aos ácidos nucléicos, conferindo-lhes uma cor azulada.

Em seguida, trate a amostra com o corante verde rápido - uma contracoloração que se liga ao tecido conjuntivo e confere uma cor verde. Em seguida, trate a amostra com uma solução de ácido acético para estabilizar as moléculas do corante. Por fim, core a amostra com laranja safranina - um corante catiônico - e incuba.

As moléculas de safranina carregadas positivamente migram em direção aos proteoglicanos carregados negativamente na cartilagem e se