Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 2:50 min. • July 8th, 2025
Os nervos periféricos consistem em axônios cercados por células de Schwann que envolvem os axônios com várias camadas de membranas celulares ricas em lipídios, formando a bainha de mielina.
Para visualizar os nervos periféricos, comece com uma lâmina de vidro carregando uma seção de nervo periférico de rato transversal, fixa, embebida em resina e tratada com tetróxido de ósmio. Seções embebidas em resina ajudam a manter a morfologia do tecido.
O tratamento com tetróxido de ósmio causa deposição de ósmio metálico na camada lipídica da bainha de mielina no local do tecido.
Pipetar solução alcalina de azul de toluidina sobre a secção do tecido. Seque a lâmina a uma temperatura adequada. As condições alcalinas e o calor facilitam a penetração do azul de toluidina através da resina na seção do tecido.
O azul de toluidina, sendo um corante catiônico, liga-se aos grupos fosfato carregados negativamente no DNA e também intercala entre os pares de bases do DNA nos núcleos das células de Schwann. Além disso, o corante se liga ao RNA no citoplasma, fora da bainha de mielina.
Adicione uma solução de montagem sobre a seção do nervo corado e cubra com uma lamínula para preparar o tecido para a i
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