Coloração Cresyl Violet de Seções de Tecido: Um Procedimento de Coloração para Visualizar Cartilagem e Ossos em Seções de Embriões de Camundongos Congelados

Para visualizar as regiões de cartilagem e osso em uma seção de tecido, comece com uma lâmina de vidro carregando uma fina seção de tecido embrionário de camundongo congelado de interesse.

Descongele brevemente a criossecção e mergulhe-a em uma concentração adequada de etanol para remover o meio de crioincorporação. A etapa de remoção ajuda a evitar o afrouxamento do meio, o que pode afetar a visualização do tecido durante a coloração. Além disso, o etanol fixa o tecido, mantendo a morfologia e integridade do tecido.

Em seguida, pipete uma solução de violeta cresil no tecido. O violeta de cresila, um corante básico carregado positivamente, liga-se a porções polianiônicas, como proteoglicanos, na matriz do tecido cartilaginoso. Considerando que, em tecido mineralizado, como ossos, ele reage com grupos carregados negativamente, como grupos fosfato na matriz óssea.

Por ser um corante metacromático, o violeta de cresil cora diferentes regiões do tecido em cores diferentes do corante natural com base em sua interação com diferentes constituintes químicos dentro dessas regiões.

Agora, lave o tecido em uma concentração adequada de etanol para remover o excesso de mancha. Mergulhe o tecido