Coloração de cristal violeta: uma técnica para visualizar células cancerígenas resistentes a medicamentos usando ensaios de formação de colônias

Em uma população heterogênea de células tumorais, o tratamento com um medicamento anticâncer mataria a maioria das células, mas as células resistentes a medicamentos sobrevivem, resultando em falha terapêutica.

Para determinar a proporção de células resistentes a medicamentos, semeie uma população heterogênea de células tumorais em uma placa de vários poços. Incubar para facilitar a adesão celular. Adicione uma concentração crescente de uma solução adequada para medicamentos anticancerígenos.

A interação com moléculas de drogas faz com que as células sensíveis morram e, posteriormente, se desprendam das placas de cultura. Em contraste, as células resistentes a medicamentos sobrevivem e permanecem presas à placa.

Aspire o meio gasto para remover as células destacadas. Adicione meios frescos sem drogas e incube a placa em condições fisiológicas. As células resistentes a medicamentos proliferam e formam colônias tumorais. Agora, adicione a solução de coloração violeta de cristal às colônias e incuba.

O cristal violeta, uma coloração de cor roxa, permeável à membrana e carregada positivamente, entra nas células e se liga às proteínas aniônicas e ao DNA, conferindo assim uma cor roxa às