Coloração de gotículas lipídicas de enócitos larvais de Drosophila: uma técnica para avaliação do acúmulo de gotículas lipídicas em condições normais e estressadas usando corante à base de BODIPY

Os enócitos larvais de Drosophila são células especializadas que se ligam na forma de aglomerados discretos na superfície basal da epiderme lateral - a camada superficial da pele. Esses enócitos estão envolvidos principalmente no metabolismo lipídico.

Durante a fome, esses enócitos acumulam gotículas lipídicas em excesso. Cada gota consiste em um núcleo hidrofóbico de lipídios neutros, como triglicerídeos e ésteres de colesterol, cercado por uma monocamada de fosfolipídios.

Para visualizar as gotículas lipídicas, pegue uma seção dissecada da epiderme larval de Drosophila com enócitos anexados. Trate com um tampão de fixação contendo paraformaldeído para reticular as proteínas celulares como proteases e preservar a integridade estrutural dos enócitos. Remova o tampão de fixação. Incube com um corante fluorescente à base de BODIPY no escuro para evitar o fotobranqueamento.

Durante a incubação, o corante apolar se difunde através da membrana celular dos enócitos e atravessa a monocamada ao redor das gotículas lipídicas. A hidrofobicidade das moléculas do corante permite que seu movimento para o núcleo apolar das gotículas lipídicas se ligue aos lipídios neutros.

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