Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 2:42 min. • July 8th, 2025
Os proteoglicanos são compostos por uma proteína central covalentemente ligada a cadeias de glicosaminoglicanos sulfatados.
Para visualizar os proteoglicanos, comece com andaimes à base de colágeno - o substrato polimérico poroso - e semeie a suspensão de células-tronco mesenquimais, ou MSC, neles. Isso fornece suporte estrutural às MSCs e permite que elas cresçam na superfície, bem como dentro das cavidades dos andaimes.
Trate as construções em um meio de diferenciação condrogênica contendo fatores de crescimento transformadores que impulsionam a transformação de MSCs em condrócitos maduros - células cartilaginosas. Os condrócitos maduros secretam proteoglicanos que formam uma rede com o colágeno no andaime.
Pegue uma seção preparada a partir da construção carregada de condrócitos. Adicione uma solução ácida de corante azul de alcian suplementada com cloridrato de guanídio e incube. Durante a incubação, o cloridrato de guanidina na solução de corante dissocia quaisquer agregados de proteoglicanos para melhor coloração.
Posteriormente, os glicosaminoglicanos sulfatados carregados negativamente dos proteoglicanos se ligam às moléculas de corante azul de alcian carregadas positivamen
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos