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Técnicas Biológicas
0 vistas • 2:50 min • July 8th, 2025
O epitélio da trompa de Falópio compreende células secretoras que produzem fluido rico em nutrientes e células ciliadas que impulsionam o óvulo banhado em líquido em direção ao útero. Alterações morfológicas e perda funcional nas células tubárias estão associadas ao câncer de trompas de Falópio.
Para visualizar a morfologia tubária, pegue uma lâmina manchada de tecido e mergulhe-a em etanol para corrigir suas características citológicas. Enxágue a lâmina em água para remover o excesso de fixador.
Agora, mergulhe a lâmina na hematoxilina, um corante catiônico que se liga ao DNA carregado negativamente, manchando o núcleo de azul. Enxágue a lâmina com água seguida de etanol para evitar manchas excessivas.
Em seguida, mergulhe a lâmina no corante Eosin Azure - uma solução policromada de marrom Bismarck, Eosina Y e verde rápido misturado em ácido fosfotúngstico. O marrom Bismarck precipita o ácido fosfotúngstico, um mordente usado pela Eosina Y, e o verde rápido para corar diferencialmente as células tubárias não cancerosas e as células cancerígenas metabolicamente ativas.
Repita a etapa de enxágue com álcool de água. Por fim, mergulhe a lâmina em xileno - um agente de limpeza que remove o excesso de componentes da mancha. Em seguida, monte a lâmina e visualize-a ao microscópio.
O epitélio normal da trompa de Falópio aparece como uma camada organizada de células ciliadas e secretoras coradas de azul claro. Em contraste, as células malignas no epitélio aparecem como aglomerados de células com núcleos escuros.
Antes de corar as células, carregue o frasco de amostra em um processador automatizado para preparação da lâmina. Quando as lâminas estiverem prontas, mergulhe as amostras em etanol a 95%, 10 vezes, por 1 segundo por mergulho, seguido de 10 mergulhos em água, por 1 segundo por mergulho.
Em seguida, mergulhe as lâminas em hematoxilina por 10 a 60 segundos, seguido por uma segunda lavagem com água e etanol. Após a última imersão em etanol, mergulhe as lâminas em Eosin Azure por 1 a 3 minutos, seguido de outro enxágue com etanol com água. Em seguida, mergulhe as lâminas em xileno; até que as amostras fiquem claras.