Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 4:14 min. • July 8th, 2025
Os fibroblastos cardíacos ativados por estresse depositam colágeno excessivo nas regiões lesionadas, uma condição chamada fibrose, que prejudica a função cardíaca.
Para visualizar a extensão da fibrose, primeiro, corte os bloqueios cardíacos embebidos em parafina. Coloque as seções em um slide. Aqueça a lâmina para derreter a parafina, permitindo que as seções adiram.
Mergulhe a lâmina em xilol para desparafinizar o tecido. Trate as seções com níveis alcoólicos descendentes, para reidratar as seções e ajudar na ligação subsequente dos componentes aquosos da mancha.
Incube as seções em um fixador ácido que reticule as proteínas, estabilizando a estrutura do tecido. Enxágue com água para remover o fixador residual.
Mergulhe a lâmina em solução de hematoxilina. O corante catiônico se liga ao DNA carregado negativamente, manchando o núcleo de azul. Enxágue com água para remover o excesso de manchas.
Incube a lâmina em ácido Fucsin-Ponceau, um corante aniônico de molécula pequena que interage com proteínas citoplasmáticas carregadas positivamente e colágeno, manchando-os de vermelho. Trate com ácido acético diluído, para remover o excesso de manchas.
Mergulhe a lâmina em solução de ácid
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