Coloração com vermelho Congo: uma técnica para visualizar depósitos de celulose em seções de caules de plantas

A celulose é um polímero não ramificado de unidades de β-glicose ligadas por ligação β-1→4 e dispostas paralelamente por meio de ligações de hidrogênio intermoleculares.

A celulose serve como o principal componente estrutural da parede celular da planta, fornecendo forma e rigidez às células e facilitando o crescimento e o desenvolvimento das plantas. A proporção de celulose dentro da parede celular varia significativamente ao longo da planta, de acordo com o tipo de célula e o estágio de crescimento.

Para visualizar a deposição de celulose no caule, faça seções transversais finas de seções de caule embebidas em agarose.

Adicione o corante fluorescente vermelho Congo e incube as seções.

As moléculas de vermelho de Congo entram na parede celular e formam ligações de hidrogênio com os grupos hidroxila da celulose, sendo adsorvidas no polímero. Isso confere uma cor vermelha à epiderme, córtex e medula.

As moléculas de corante também se difundem dentro das complexas paredes celulares do xilema e das fibras interfasciculares, atravessando a barreira rígida da lignina, conferindo assim uma cor vermelha a esses tecidos também.

Agora, enxágue as seções em água para remover o excesso de mancha. Transfira as seções para uma lâmina de microscópio e coloque uma lamínula.

Quando visualizados sob um microscópio de fluorescência, a epiderme, o córtex, a medula central, o xilema e as fibras interfasciculares aparecem em vermelho, correspondendo ao seu conteúdo de celulose.

Para a coloração com vermelho Congo, transfira as seções do caule para um tubo de microcentrífuga e adicione 1 mililitro da solução de vermelho Congo a 0,5%. Pipetar suavemente a solução de vermelho Congo a 0,5% para cima e para baixo, sem perturbar as secções, antes de incubar e lavar as secções conforme descrito no protocolo de texto. Pipete suavemente as seções em uma ponta de pipeta cortada e em uma lâmina de microscópio e, em seguida, cubra-as com uma lamínula. Observe as amostras na lâmina do microscópio sob excitação de luz azul usando um filtro de emissão de 560 nanômetros.