Coloração branca de calcofluor: um método simples para visualização de fluorescência induzida por UV de depósitos de celulose em paredes celulares de seções de caule de plantas dicotiledôneas

Nas células vegetais, a parede celular, uma camada protetora especializada, envolve a membrana plasmática. A parede celular é predominantemente composta de celulose, um polissacarídeo linear e não ramificado de monômeros de glicose ligados de ponta a ponta por meio de ligações glicosídicas β-1, 4.

A celulose existe em um estado agregado na forma de microfibrilas de celulose dispostas ortogonalmente, embutidas em uma matriz de hemicelulose, pectina e proteína.

Certas células, como as do tecido do xilema vascular e das fibras interfasciculares, também incluem lignina, um agente endurecedor, em suas paredes celulares.

Para visualizar a deposição de celulose nas paredes celulares das plantas, comece com seções transversais embebidas em agarose de um caule de planta dicotiledônea em tampão. Adicione uma solução aquosa de calcofluor white, um corante quimiofluorescente e planar. Incube para permitir que o corante se difunda no tecido.

Uma vez dentro, o branco de calcofluor por meio de seus grupos funcionais hidroxila interage e forma ligações de hidrogênio com grupos hidroxila de monômeros de glicose na celulose. Isso aproxima o corante da celulose e favorece interações adicionais de van