Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 5:05 min. • July 8th, 2025
A microscopia de folha de luz de rede, LLSM, permite a visualização das interações receptor-ligante da superfície celular em células vivas com alta resolução espaço-temporal.
Pegue uma lamínula contendo células que expressam ligantes transduzidas emitindo fluorescência vermelha. Prenda a lamínula com a célula voltada para cima em um porta-amostras lubrificado. Fixe o suporte no piezo de uma platina de microscópio para permitir o posicionamento preciso da amostra e a varredura durante a geração de imagens. Ajuste as configurações do software para focar em uma única célula que expressa o ligante.
Pipetar a suspensão de células que exprimem o recetor para a lamínula. Os receptores são marcados com anticorpos verdes marcados com fluoróforo. Visualize os pares de células em interação.
O laser de excitação do microscópio emite um feixe de laser circular polarizado linearmente que passa por lentes cilíndricas para criar uma folha de luz. A folha de luz é projetada em um modulador que remove o excesso de difração e o transforma em um padrão de treliça ultrafino.
A folha de luz treliçada ilumina uma seção ultrafina do par de células em interação, e a fluorescência emitida pelas células em i
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