Microscopia de campo escuro para visualizar a dinâmica difusional de nanobastões na membrana celular

Para investigar a dinâmica de difusão de nanobastões de ouro em uma membrana de células vivas usando microscopia de campo escuro, DFM, combinado com rastreamento de partícula única, comece com uma lamínula esterilizada em uma placa de cultura contendo meio adequado. Adicione a suspensão da célula na lamínula. O meio facilita o crescimento celular.

Incube com nanobastões de ouro carregados positivamente que adsorvem na membrana celular carregada negativamente por meio de interações eletrostáticas. Pipete o meio do prato para a ranhura de uma lâmina de vidro. Coloque a lamínula com o lado da célula voltado para baixo na ranhura e sele.

Coloque a lâmina na platina do microscópio de campo escuro. O microscópio ilumina a amostra com uma luz oblíqua de alto ângulo que passa por um condensador de campo escuro especializado.

Após a iluminação dos nanobastões, os elétrons livres na superfície do nanobastões oscilam em uma frequência ressonante com a luz incidente. Os elétrons oscilantes espalham a luz em um comprimento de onda específico capturado pela lente objetiva, permitindo a visualização de nanobastões.

Da mesma forma, a membrana celular - composta de lipídios e proteínas - espalha a