Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 4:56 min. • July 8th, 2025
Os nucleossomos - unidades repetitivas de DNA eucariótico - consistem em segmentos de DNA enrolados em núcleos de proteínas histonas. O desenvoltório do DNA ao redor do núcleo da histona é crucial para a dinâmica dos nucleossomos.
Para capturar a dinâmica do nucleossomo, comece com um substrato de mica liso e funcionalizado montado em um microscópio de força atômica, AFM, estágio de scanner. Cubra o substrato com um tampão contendo nucleossomos.
O DNA do nucleossomo carregado negativamente interage com cargas positivas na mica funcionalizada, imobilizando-as na superfície. Lave o substrato de mica imobilizado com um tampão para evitar a superlotação dos nucleossomos.
Transfira o estágio do scanner contendo nucleossomos para uma câmara de imagem contendo um balanço pré-montado, com uma ponta na borda e voltada para cima em direção aos nucleossomos.
Encha a câmara com um tampão de imagem. Alinhe o feixe de laser na parte traseira do cantilever para garantir medições precisas de deflexão.
A ponta do AFM oscila perto dos nucleossomos inteiramente envolvidos e examina sobre a superfície para medir a altura dos nucleossomos em intervalos regulares.
O desenvoltório espontâneo do DNA aumen
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