Geração in vitro de células dendríticas plasmocitoides a partir de progenitores linfóides comuns

As células dendríticas plasmocitoides, ou pDCs, são células imunes que respondem à infecção produzindo a citocina interferon tipo I.

Para gerar pDCs in vitro, pegue uma suspensão de células progenitoras linfóides comuns, ou CLPs, isoladas da medula óssea de camundongos. Os CLPs podem se diferenciar em linfócitos e células dendríticas.

Adicione a suspensão celular sobre uma camada de células alimentadoras - células estromais aderentes - irradiadas com raios gama para inibir a proliferação. As células alimentadoras fornecem citocinas e contato célula-célula necessários para a diferenciação de CLPs.

Adicione uma concentração adequada de ligante tirosina quinase 3 semelhante a Fms, ou FL - uma citocina bivalente que promove o desenvolvimento de pDC - e incuba.

Os CLPs migram entre as células alimentadoras e proliferam para formar grupos de células, denominadas áreas de paralelepípedos.

O FL no meio se liga ao receptor Flt3 - um receptor de tirosina quinase - nos CLPs. A ligação induz a dimerização do receptor e a autofosforilação dos resíduos de tirosina no domínio citoplasmático.

As proteínas adaptadoras citoplasmáticas se ligam a esses resíduos e tornam-se fosforiladas, transduzindo